CWL-M萃取设备对草本植物中总黄酮提取工艺研究
探讨常压下水煎煮法提取草本植物中总黄酮的工艺。防法」采用料液比、煎煮温度和煎煮时间为主要因素进行正交试验，以确定总黄酮的最佳提取工艺。嘴果」草本植物中总黄酮的最佳提取条件为料液比1:5 g/L 煮沸，煎煮时间75 min，在此条件下总黄酮得率约为0. 734% 。为后续草本植物饮料产品的研发提供了相关资料。
近年来，随着生活水平的提高，人们对于保健越来越重视，对于保健品的认识也逐渐趋于理性化。由此，促进了一些基于草本植物保健饮品生产企业的发展。草本植物中含有各种生物活性成分，如总黄酮、总皂普、各种活性多糖以及一些抗氧化物质等。目前，对于草本植物中各种活性成分的提取主要有水煎煮法、超临界流体萃取、超滤膜分离技术、大孔吸附树脂分离纯化技术、超声提取技术以及微波萃取技术等。其中，水煎煮法是最传统的提取方法，它是在草本植物中加入适量的水，然后加热至一定温度并保持一定时间后滤出煮液的方法。该方法不仅简便易行，而且能煎出大部分有效成分，是最常用的提取草本植物中活性成分的方法之一。笔者以某公司提供的草本植物为原料，研究水煎煮法提取其总黄酮的工艺，以期为后续草本植物饮品的研发提供相关资料。
草本植物中总黄酮提取工艺。工艺流程见图1。
具体步骤为:取一小包装草本植物，平均约170 g，用清水反复冲洗3次，清除表面杂质和灰尘等。按料液比1:5 g几加水，加热至沸腾并维持75 min，使草本植物中的总黄酮最大量浸出。煎煮结束后，先采用6层纱布进行粗滤，滤除较大的草本植物残渣，所得滤液再用高速离心机5 000 r/min离心10min，分离除去细微残渣，最后得澄清提取液。测定所得提取液中的总黄酮含量。
总黄酮含量测定。
芦丁对照品溶液配制。精密称取120℃减压干燥至恒重的芦丁50. 5 mg，置于250 ml容量瓶中，加甲醇溶解，置水浴上微热溶解，冷却，加甲醇至刻度，摇匀，即得0. 202mg / ml芦丁对照品溶液。
测定波长的选择。
精密吸取芦丁对照品溶液及草本植物提取液各4 ml，置于25 ml量瓶中，加5 % NaNO2溶液1 ml，摇匀，放置6 min，加Al ( NO3 ) 3溶液1 ml，摇匀，放置6min，加4% NaOH溶液1 ml，再用水稀释至刻度，摇匀，15 min后置1 cm比色皿中，随行试剂作空白对照，在300 ~600 nm扫描，找到最大吸收波长。
标准曲线的绘制。精密吸取芦丁对照品溶液0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0 ml置于25 ml量瓶中，。以浓度(C)与吸光值(A)进行直线回归，得线性回归方程及相关系数。
样品中总黄酮含量测定。精密吸取草本植物提取液4 ml于25 ml容量瓶中，平行操作3次，同时设空白对照。
试验设计。
为确定总黄酮的最佳提取工艺，以料液比、煎煮温度和煎煮时间为主要因素进行正交试验。正交试验因素水平见表to1.2.4总黄酮得率计算。根据以下公式计算:
总黄酮得率=(提取液中总黄酮的含量/草本植物试样的质量)x 100%
标准曲线的绘制经波谱扫描芦丁最大吸收波长为510 nm，在510 nm处测定不同浓度下芦丁溶液的吸光值，并绘制标准曲线，见图2。
由图2得线性回归方程为A =12. 369C -0. 1191，相关系数(R²)为0. 924 5，曲线在0.01~0.05 mg / ml范围内有良好的线性关系。
最佳提取工艺的确定由表2可知，3个因素对总黄酮提取的影响主次关系为煎煮温度>料液比>煎煮时间，同时得出最佳工艺为料液比1:7 g/L，沸水，煎煮时间75 min，此时所得提取液中总黄酮含量为1 280 mg。从表2还可以看出，料液比也可选为1:5 g/L，在此条件下提取液中总黄酮含量为1 247 mg，虽然产量稍低，但可为企业大幅度降低生产成本。因此，最终确定总黄酮的提取工艺为料液比1:5 g/L，沸水，煎煮时间75 min，此时总黄酮得率约为0. 734%
3小结
试验以草本植物为原料，采用传统水煎煮法提取其中的生物活性物质总黄酮，并结合生产实际得出最佳提取工艺条件:料液比1:5 g/L，沸水，煎煮时间75 min，此条件下总黄酮得率约为0. 734% .
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