植物提取基础处理黄酮类化合物的分离、纯化
1溶剂萃取法
溶剂萃取法是根据待分离的物质在两种溶剂中的溶解度不同来实现分离的,在分离的过程中可以根据待分离物质的极性不同,不同极性的溶剂可以对待分离的物质起到一个初步的纯化过程。溶剂萃取法操作方便,使用的设备比较简单,但是和现代的分离技术相比,其分离效率低,并且以手工萃取为主,操作的重现性差。路世武等人[[33]研究了溶剂萃取法萃取番茄红素的最佳工艺条件,研究结果表明二氯甲烷具有沸点低,易于分离回收等优点,可以有效的萃取番茄红素,在提取时间60 min,提取温度38℃,提取次数3次,料液比1:3的条件下番茄红素的提取效率最高。植物提取基础处理黄酮类化合物的分离、纯化
2硅胶柱层析法
硅胶层析法分离的原理是根据不同极性的物质在硅胶上的吸附能力不同,一般情况下极性较大的物质容易被硅胶吸附,极性较弱的物质不容易被硅胶吸附,所以弱极性物质会先被洗脱下来,极性越强的物质越不容易被洗脱,所以整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸的过程。硅胶柱层析法主要适合于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化的黄酮及黄酮醇类化合物。姚某等人使用硅胶对大豆异黄酮主要单体组分的分离方法进行了研究,研究结果表明使用300-400口的硅胶,洗脱剂为氯仿一甲醇((5 : 1,v/v)、流迷为1.0 mL/min的条件下,可以很好的分离染料木普、大豆普、染料木黄酮和大豆普元4种大豆中主要的单体组分,并且对大豆异黄酮普元的分离效果更好。
3聚酞胺柱层析法
对黄酮类化合物的分离来说,聚酞胺是较为理想的吸附剂,因为大多数黄酮类化合物都具有一定数口的轻基。聚酞胺层析法的主要原理是氢键吸附,在分离过程中,吸附强度由分子中的轻基数口与位置,以及溶剂与黄酮类化合物或溶剂与聚酞胺之间形成氢键缔合能力的大小来决定的。但是聚酞胺的死吸附高,不适合于在原料比较少的条件下进行分离。白云娥等人[[35]比较了三种聚酞胺对金莲花中的总黄酮的分离效果,发现使用60-80目聚酞胺对金银花总黄酮的吸附与解吸效果最好,并且上样药液的最佳pH值为3,上样浓度为1: 3 (g/mL) 最大吸附容量为0.2833 g/mL,洗脱溶剂为水和50%的乙醇。植物提取基础处理黄酮类化合物的分离、纯化
4葡聚糖凝胶柱色谱法
葡聚糖凝胶柱色谱法的分离原理是:在分离的过程中,分子量大的物质由于未进入葡聚糖凝胶柱的内部使其能迅迷的流出,相对分子质量比较小的物质,能进入葡聚糖凝胶柱的空穴内,所以其流出迷度比较慢,所以在使用葡聚糖凝胶色谱柱分离黄酮类化合物时,黄酮类化合物是以相对分子量递减的次序依次被洗脱的,葡萄糖凝胶柱色谱法适用于经过纸色谱、薄层色谱、硅胶及聚酞胺色谱分离得到的较高纯度物质的进一步分离。蒋某等人先使用聚酞胺色谱,分离出了黎篙提取物中的黄酮普元和黄酮普类化合物,然后利用Sephadex LH-20对黄酮普类化合物进行了分离纯化,最后根据化合物的理化性质和波谱特征鉴定了分离出的化合物的化学结构,两种化合物分别是柯依利素-7-0-β-D-葡萄糖普和榭皮素-7-0-β-D-木糖普。
5梯度pH萃取法
梯度pH萃取法适合于对酸性强弱具有明显不同的黄酮普元的分离。黄酮普元类化合物中酚轻基的数口及位置的不同会造成其酸性强弱也不同,所以在分离的过程中,可以先将混合物溶于有机溶剂后,依次使用不同强度的碱液进行梯度萃取,然后使用酸中和,将混合物中的黄酮类化合物游离出来,最后使用有机溶剂进行反萃取,将所需要的有效成分分离出来的一种方法,汪某等人对葛花总黄酮的提取和纯化工艺进行了研究,主要研究了正丁醇萃取层葛花异黄酮的精制,发现仅仅依靠正丁醇不能很好的纯化葛花异黄酮,考虑到大多数的葛花异黄酮有两个以上的酚轻基,所以易于与弱碱形成盐,所以在纯化的过程中可以使用不同浓度的碳酸钠可以对葛花中的异黄酮进行一个简单的纯化。植物提取基础处理黄酮类化合物的分离、纯化
6根据特定的官能团进行分离
根据黄酮类化合物的轻基的位置不同,其化学性质不同,可以分离具有特定官能团的黄酮类化合物,但是此种分离方法的使用由于对官能团的种类和位置的严格要求受到一定的限制。
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